稳定同位素内标应选择同位素丰度>98%以上的标准品

　　稳定同位素内标记化合物与对应的未标记化合结构相似，所以理化性质也极为相似，如果将稳定同位素标记物与对应的未标物用同样的色谱方法检测，其保留时间也几乎一致，无法分辨。且稳定同位素不具有放射性，无论在标记化合物合成、分离提纯及应用过程中均无特殊防护要求，可作为内标用于临床医学研究及生物医学、环境科学、食品检测等诸多领域。

　　如何挑选稳定同位素内标？

　　1、应尽量选择同位素丰度>98%以上的标准品。

　　2、如果选择氘代产品作为内标，需选择质量差大于3(D3)以上的产品。

　　3、13C,15N通常标记在分子的骨架结构上，其标记位点较为稳定,氘代产品容易与液相流动相溶剂中的活泼氢发生交换，因此稳定性不如13C,15N。如图3，草甘膦如果用D标记的话，羧基、亚氨基、羟基上面的D都属于活泼位点，很容易脱离母体化合物，所以安谱实验选择13C,15N来进行标记。另外考虑到氘标记物的合成较为简便，价格便宜，因此在氘标记物能够满足实验需求的情况下，也常选用氘标记物作为内标物。

　　4、标记位点还应远离容易发生化学键断裂的位置，以避开同位素效应的影响。在质谱中邻苯二甲酸二甲酯的酯基容易断裂，所以安谱实验选择氘标记在苯环上。如果母体化合物因化学键断裂同时生成2个重要子单元结构化合物，可选择双标记母体化合物。

　　稳定同位素内标是质谱方法，没有别的临床检测方法用到同位素内标。比如光吸收和免疫的方法，都无法分辨出被检测物和同位素内标的区别，因为它们的理化性质太接近了。如果真的加进内标，那测出来的值肯定大大的偏高。只有质谱才能把同位素内标和要检测的物质分得开，虽然它们的差别只有几个道尔顿。现在的内标基本都是稳定同位素标记的，最常见的是D和13C。同位素内标和被检测物是同一个物质，但是其中的几个氢原子被氘所取代，或者是12C换成了13C，理化性质基本不变。